“IDENTIFICACION DE GLUCOSA EN ORINA”

PRACTICAS DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRACTICA N° 5

“IDENTIFICACION DE  GLUCOSA EN ORINA”

OBJETIVOS:

·         Al término de la práctica, el alumno estará capacitado para  medir la glucosa en orina por distintos medios.

·         Saber dar un diagnostico acertado leyendo los niveles de glucosa en la orina.

Introducción:

La glucosa se determina habitualmente en un análisis de sangre (glucemia) o en un análisis de orina (glucosuria).
La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia).

La determinación de glucosa en orina (glucosuria), suele formar parte del análisis de orina rutinario. En condiciones normales, no debería haber glucosa en la orina, pero cuando la cantidad en sangre supera un determinado límite, empieza a ser eliminada a través del riñón con la orina.
Cuanta más cantidad de glucosa haya en la sangre, más se eliminará por la orina.
La determinación en orina es menos exacta y menos útil que la determinación en sangre.

El examen general de orina (EGO) es una prueba de gran importancia para el clínico y para el paciente mismo. El uroanálisis es algo más que la simple impregnación de la tira y la observación del sedimento, es la aplicación de todos nuestros conocimientos y el empleo de todos nuestros recursos dentro del laboratorio para proporcionar al médico y al paciente resultados de y con calidad.

El análisis de orina realizado en el laboratorio clínico, puede proporcionar una información amplia, variada y útil del riñón de un individuo y de las enfermedades sistémicas que pueden afectar este órgano excretor. Por medio de este análisis, es posible elucidar tanto desórdenes estructurales (anatómicos) como desórdenes funcionales (fisiológicos) del riñón y del tracto urinario inferior, sus causas, y su pronóstico. La realización cuidadosa del examen de orina, por parte del laboratorio, ayuda al diagnóstico diferencial de numerosas enfermedades del sistema urinario. Usualmente, los datos de laboratorio obtenidos por medio de este análisis, se logran sin dolor, daño o tensión para el paciente

En la actualidad, se practican tres tipos de exámenes de orina: análisis de orina por tira húmeda, empleado generalmente por los médicos en sus consultorios y por los pacientes en sus casas; tamizaje de análisis húmedo de la orina, comúnmente llamado análisis básico o rutinario de orina; y citodiagnóstico de la orina, que es una evaluación citológica especializada del sedimento urinario que correlaciona con los análisis realizados por medio de la tira reactiva. El análisis de orina realizado con la tira húmeda es un ensayo de primera etapa para la detección y monitoreo de pacientes con anormalidades químicas. El análisis de orina húmedo o rutinario, proporciona, a costos razonables, un tamizaje adecuado para la detección de anormalidades químicas y morfológicas presentes en la orina.
La Glucosa es una sustancia reductora, la cual reduce al sulfato cúprico (color azul), de la solución de Benedict , a óxido cúprico (color rojo) que es insoluble.

EXPLICACIÓN DE LAS TIRAS REACTIVAS.

Las tiras reactivas para uroanálisis son bases plásticas en las que hay adheridas diversas áreas reactivas para determinar Glucosa, Bilirrubina, Acetona, Densidad, Sangre, pH, Proteínas, Urobilinógeno, Nitritos y Leucocitos.

Los resultados obtenidos por las tiras reactivas proporcionan información referente al metabolismo de carbohidratos, función hepática y renal, balance ácido-base e infecciones del tracto urinario.

Las tiras reactivas están listas para utilizarse y son desechables. Estas pueden ser leídas visualmente aunque existen presentaciones que pueden ser leídas instrumentalmente empleando auto analizadores .

Las instrucciones deben seguirse correctamente, considerando los tiempos de espera para cada parámetro así como los procedimientos de almacenaje y utilización.

Los valores mínimos detectables para la mayoría de las tiras se resume en la tabla correspondiente.

Tabla 1. Valores mínimos detectables de las tiras reactivas.

Area Reactiva	Tiempo de Lectura	Sensibilidad
Glucosa Bilirrubina Cetona Sangre Proteína Nitritos Leucocitos pH Densidad	30" 30" 40" 60" 60" 60" 2’ 60" 45"	75-125 mg/dL 0.4-0.8 mg/dL 5-10 mg/dL (Acido acetoacético) 0.015-0.062 mg/dL (Hemoglobina) 15-30 mg/dL (Albumina) 0.06-0.1 mg/dL (Ion nitrito) 5-15 células /m L 5.0-8.5 1.000-1.030

MATERIAL

1 gradilla

 2 tubos de ensaye
1 pipeta de 5 ml
4 pipetas de 1 o 2 ml

Perilla con cánula del n°3

Tiras reactivas.

Recipiente para recoger la orina.

Diario o libreta de resultados del autoanálisis.

SUSTANCIAS

Solución de Benedict

1 muestra de suero en ayunas

TÉCNICA:

1.      URIANALISIS

Este procedimiento se compone de dos partes:

1.    Un análisis macroscópico, en el cual se determinan las características fisicoquímicas (apariencia, gravedad específica y la medición de los constituyentes químicos por medio de la tira).

2.    Preparación del material a utilizar. Lavarse las manos, sacar la tira reactiva del envase, mojar brevemente (uno o dos segundos como máximo), el extremo de la tira que contiene el reactivo en el recipiente con orina.
Eliminar el exceso de orina. (Bien sacudiendo la tira o limpiando el canto de la misma con el borde del recipiente).  Esperar el tiempo marcado para la reacción de la tira y comparar el color con la escala de colores que figura en el envase de las tiras reactivas.

3.    Y un examen microscópico del sedimento, en campo claro o contraste de fases, para verificar hematuria, piuria, cilindruria, cristaluria, y otros signos. Por medio de este simple examen de orina, un uromicroscopista experimentado puede detectar y monitorear muchas entidades que afectan al riñón y al tracto urinario inferior.

4.    Anotar el resultado en el diario o libreta de autoanálisis, así como cualquier otra            información que pueda ser de interés o tenga repercusión sobre la glucosuria obtenida

Determinación de glucosa en orina.
Método.

1.    Con una pipeta depositar 5 mL de solución de Benedict en un tubo de ensayo.

2.    Agregar 8 gotas de orina y mezclar completamente.

3.    Hervir durante 2 minutos.

4.    Dejar enfriar la muestra a temperatura ambiente.

5.    Examinar la muestra y ver si existe algún cambio de color o precipitado. 

 

Resultados.

Color	Resultado	Concentración mmol/L*
Azul Verde Verde con precipitado amarillo Desde amarillo hasta verde oscuro Castaño Desde anaranjado hasta rojo ladrillo	Negativo Huellas + ++ +++ ++++	0 14 28 56 83 111 ó más

*Dividir el resultado por 0.055 para convertirlo a mg/dL

Reactivo de Benedict.

1.    Disolver los cristales de sulfato cúprico por calentamiento en 100 ml de agua destilada (solución A)

2.    Disolver el citrato trisódico y el carbonato sódico aproximadamente en 800 ml de agua (Solución B).

3.    Añadir la solución A lentamente a la solución B, removiendo constantemente.

4.    Completar a 1000 ml.

Conclusión: Al termino de nuestra practica pudimos concluir que los análisis que se le hacen a la muestra de la orina son de suma importancia; estuvimos capacitados  para  medir la glucosa en orina por distintos medios. Además aprendimos a como elaborar correctamente un diagnostico sobre análisis en la orina; así como detectar los niveles de glucosa en dicha muestra.
 Conocimos que la glucosa se determina habitualmente en un análisis de sangre (glucemia) o en un análisis de orina (glucosuria).

Cuestionario:

1.   Cual es el análisis que se utiliza para medir los niveles de glucosa en la orina?

R= un análisis de orina (glucosuria).

2.    Donde se almacena principalmente la glucosa y cual es su función?

R= es la principal fuente de energía para el metabolismo celular., y se almacena principalmente en el hígado

3.    Menciona tres tipos de análisis clínicos que se le hacen a la orina?

R= análisis de orina por tira húmeda, tamizaje de análisis húmedo de la orina, citodiagnóstico de la orina.

      4.- Que es la glucosa?

R= es una sustancia reductora, la cual reduce al sulfato cúprico (color azul), de la solución de Benedict, a óxido cúprico (color rojo) que es insoluble.

     5.- Que son las tiras reactivas?

R= Las tiras reactivas para uroanálisis son bases plásticas en las que hay adheridas diversas áreas reactivas para determinar Glucosa, Bilirrubina, Acetona, Densidad, Sangre, pH, Proteínas, Urobilinógeno, Nitritos y Leucocitos.

Bibliografía
Argeri-Lopardo. Análisis de orina. Fundamentos y Práctica. Editorial Médica Panamericana. Argentina 1993.
Bernard, J.H. Diagnóstico y Tratamientos Clínicos por el laboratorio. 8ª Ed. Editorial Salvat, españa 1988.
Graff, S.L. análisis de Orina, Atlas Color. Editorial Médica Panamericana. Argentina 1987.
Serie Paltex. Manual de Técnicas Básicas para un laboratorio de Salud. O.P.S. 1983.
Strasinger, S.K. Líquidos Corporales y Análisis de Orina. Manual Moderno, México 1991.

Resumen de Los Carbohidratos.!

RESUMEN

Los carbohidratos están ampliamente distribuidos en la naturaleza, particularmente en el reino vegetal. La principal excepción es la lactosa, el disacárido que se encuentra en la leche y productos elaborados con ella. Aunque el glucógeno se almacena en el tejido muscular, solo se encuentra en cantidades muy pequeñas en la carne.Las mayores fuentes de los carbohidratos en la alimentación son almidones y dextrinas de cereales, raíces, tubérculos y leguminosas.La miel de abejas, las frutas y varios vegetales contienen monosacáridos y disacáridos.

 La glucosa, se forma como un azúcar natural en los alimentos o se produce en el cuerpo como resultado de la digestión de carbohidratos más complejos. La fructosa o el azúcar de las frutas está presente en grandes cantidades en las frutas y en la miel y es el más dulce de los azúcares sencillos. Aunque se absorbe algo de fructosa directamente del tracto intestinal a la sangre, finalmente se convierte todo en glucosa. La galactosa no se encuentra fácilmente en la naturaleza y debe ser producida a partir del azúcar de la leche en las glándulas mamíferas de los animales lactantes. En el cuerpo, la galactosa se convierte en glucosa para el metabolismo energético. La sacarosa es el disacárido dietético más común. Se encuentra naturalmente en el azúcar de caña, la remolacha y miel La lactosa se encuentra de forma natural sólo en la leche y a menudo se la denomina el azúcar de leche.

La fécula es la forma más familiar del polisacárido vegetal. Se encuentra en las semillas, el maíz, y los diversos cereales de los que se hacen el pan, los espaguetis, y las pastas. Existen grandes cantidades en los guisantes, las judías, las patatas y las raíces, donde sirve como un almacén de energía para su uso posterior por las plantas. La celulosa y la mayoría de los demás materiales fibrosos que se resisten a las enzimas digestivas humanas son otra forma de polisacáridos. Se encuentran exclusivamente en las plantas y constituyen la parte estructural de las hojas, tallos, raíces, semillas y las cáscaras de las frutas.El glucógeno es el polisacárido sintetizado de la glucosa en el proceso de glucogénesis y almacenado en los tejidos de animales.

Como se analizo los carbohidratos los encontramos principalmente en las frutas pero eso no significa que no estén presentes en el cuerpo humano y tienen funciones muy importantes en el como su balance energético;la principal función de los hidratos de carbono es la producción de energía (aportan 4 kcal/gramo y la fibra 2 kcal/gramo) para el mantenimiento de las funciones vitales.Los carbohidratos se acumulan en el organismo en forma de glucógeno, pero los depósitos de glucógeno son pequeños (500 gr) por lo que el exceso ha de ser oxidado o convertido en grasa y depositado en el tejido adiposo con un alto coste energético, además el sistema nervioso y las células sanguíneas utilizan la glucosa como fuente casi exclusiva de energía.

De todos los nutrientes que se puedan emplear para obtener energía, los glúcidos son los que producen una combustión más limpia en nuestras células y dejan menos residuos en el organismo. De hecho, el cerebro y el sistema nervioso solamente utilizan glucosa para obtener energía. Se almacenan en forma de glucógeno en el músculo y en el hígado la utilización de una u otra es importante, ya que tienen funciones diferentes:

·         El glucógeno del hígado regula la concentración de glucosa en sangre, y es esta glucosa la que alimenta el cerebro de forma constante.

·         Por su parte, el glucógeno muscular debe abastecer las necesidades del músculo para llevar a cabo el trabajo derivado del desarrollo de la actividad deportiva.

Prácticamente la totalidad de los glúcidos que consumimos son transformados en glucosa y absorbidos por el intestino. Posteriormente pasan al hígado donde son transformados a glucógeno, que es una sustancia de reserva de energía para ser usada en los periodos en que no hay glucosa disponible (entre comidas). Según se va necesitando, el glucógeno se convierte en glucosa, que pasa a la sangre para ser utilizada en los diferentes tejidos. También se almacena glucógeno en los músculos, pero esta reserva de energía sólo se utiliza para producir energía en el propio músculo. Si se alcanza este límite, el exceso de glucosa en la sangre se transforma en grasa y se acumula en el tejido adiposo como reserva energética a largo plazo  Todos los procesos metabólicos en los que intervienen los glúcidos están controlados por el sistema nervioso central, que a través de la insulina retira la glucosa de la sangre cuando su concentración es muy alta. Todos los azúcares se convierten finalmente, en el organismo, en glucosa. También ayudan a regular el metabolismo de las proteínas y grasas; las grasas requieren de los carbohidratos para su descomposición dentro del hígado.

En nuestro cuerpo encontramos diferentes carbohidratos esenciales para nuestro organismo, sin embargo, otras macromoléculas que el organismo necesita aunque en pequeñas proporciones son las grasas estas tienen funciones tanto estructurales como metabólicas. ¿Pero como se encuentran n la naturaleza?Todas las grasas son insolubles en agua teniendo una densidad significativamente inferior (flotan en el agua).

Químicamente, las grasas son generalmente triésteres del glicerol y ácidos grasos. Las grasas pueden ser sólidas o líquidas a temperatura ambiente, dependiendo de su estructura y composición. Aunque las palabras "aceites", "grasas" y "lípidos" se utilizan para referirse a las grasas, "aceites" suele emplearse para referirse a lípidos que son líquidos a temperatura ambiente, mientras que "grasas" suele designar los lípidos sólidos a temperatura ambiente. La palabra "lípidos" se emplea para referirse a ambos tipos, líquidos y sólidos. La palabra "aceite" se aplica generalmente a cualquier sustancia grasosa inmiscible con agua, tales como el petróleo y el aceite de cocina, independientemente de su estructura química.

Las grasas forman una categoría de lípidos que se distinguen de otros lípidos por su estructura química y sus propiedades físicas. Las grasas saturadas tienden a ser grasas animales y están sólidas a temperatura ambiente. La mantequilla, la manteca, el tocino, y la grasa de la carne son grasas saturadas. Las grasas insaturadas son líquidas a temperatura ambiente. Normalmente, son de origen vegetal, aunque los aceites de pescado también pueden contener muchos ácidos grasos poliinsaturados. Se pueden endurecer los aceites añadiendo átomos de hidrógeno, convirtiendo las uniones dobles en sencillas. Este proceso se llama la hidrogenación. Los aceites vegetales hidrogenizados están presentes a menudo en la margarina u otros alimentos procesados. Aceites vegetales son grasa que permanecen en estado líquido a temperatura ambiente.

Sin embargo, también dentro de las grasas encontramos el colesterol. Muchas personas piensan que el colesterol es nocivo para la salud, la mayoría desconoce que se trata de un compuesto químico indispensable para el funcionamiento normal de nuestro organismo, sobre todo, para formar ácido cólico en el hígado; el 80% absorbido al nivel del tubo digestivo y termina transformándose en ácido cólico, este se combina con otras sustancias para dar origen a las sales biliares, que facilitan la digestión y la absorción de las grasas en el intestino delgado del hombre.  Una pequeña cantidad de colesterol se utiliza por las glándulas suprarrenales para la síntesis de hormonas corticosuprarrenales, por los ovarios para formar progesterona y estrógenos y por los testículos para formar testosterona.

El colesterol es esencial como componente de las membranas celulares y como precursor de los ácidos biliares y de ciertas hormonas. El cuerpo puede producir su propio colesterol, así que no se necesita una fuente dietética. El colesterol puede causar placas arteriales si los niveles están demasiado altos. Esto puede resultar en arteriosclerosis, y por eso se lo relaciona con las enfermedades cardíacas. Las LBD causan problemas cardíacos. El colesterol LAD puede ayudar a proteger contra el riesgo de las enfermedades cardíacas.

La cantidad de colesterol dietético no tiene relación clara con los niveles de colesterol en la sangre. El colesterol sanguíneo se relaciona más con la cantidad de grasas saturadas en la dieta, y eso aumenta el nivel de colesterol sanguíneo. Se duda que las grasas insaturadas aumenten el nivel de colesterol en la sangre, y es posible que lo reduzcan. Sin embargo el colesterol en mayor proporción que la normal si puede ser nocivo para la salud sino se lleva un control de la que se come.

Aunque a menudo se considera que no es sano consumir grasas, conviene recordar que éstas desempeñan una serie de funciones vitales en nuestro organismo.

• La grasa es la principal reserva energética del cuerpo humano y es la fuente de energía más concentrada de la dieta - 1 gramo de grasa aporta 37kJ (9 Kcal), más del doble de la que proporcionan las proteínas o los carbohidratos (4 Kcal). Los depósitos de grasa del cuerpo humano se utilizan para satisfacer las exigencias energéticas cuando se reduce la energía aportada por la dieta, por ejemplo si las personas tienen poco apetito o en estados de inanición. También pueden ser necesarios para satisfacer necesidades energéticas altas, como cuando se realizan actividades físicas intensas o para niños o bebés en edad de crecimiento.
• Además de ser una reserva de energía, los depósitos grasos rodean y protegen los órganos vitales y contribuyen a aislar al organismo del frío.
• En los alimentos, la grasa transporta las vitaminas liposolubles A, D, E y K y permite la absorción de dichas vitaminas. Aporta los ácidos grasos esenciales, el ácido linoleico (omega-6) y el ácido alfa-linolénico (omega-3).

• Producción de energía: la metabolización de 1 g de cualquier grasa produce, por término medio, unas 9 kilocalorías de energía.
• Forman el panículo adiposo que protege a los mamíferos contra el frío.
• Sujetan y protegen órganos como el corazón y los riñones.